Хеликобактер пилори, определение ДНК в кале с помощью ПЦР (Helicobacter pylori, DNA, feces)

Определение ДНК хеликобактер пилори в кале методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori, H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. По оценкам эпидемиологов, присутствие этой бактерии в желудке можно обнаружить примерно у половины населения планеты, а в некоторых регионах у 80-100%. Нередко у инфицированных симптомы заболевания отсутствуют. При этом выявлена корреляция между наличием H. pylori в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и подтвержденными патологиями желудка и двенадцатиперстной кишки, такими как диспепсия, хронический и атрофический гастрит, язвенная болезнь. Длительное воспаление стенки желудка и изменения его клеток из-за воздействия H. pylori могут привести к развитию рака желудка. Вероятность возникновения тяжелых, угрожающих жизни пациента состояний зависит от штамма и его вирулентности, индивидуальных особенностей организма и условий жизни. 

Заражение H. pylori возможно уже в возрасте 3-8 лет, с момента начала посещения ребенком детских учреждений. Для этого микроорганизма характерен фекально-оральный, орально-оральный и бытовой пути передачи. 

Методы диагностики инфекции H. pylori разделяют на инвазивные, требующие проведения фиброгастродуоденоскопии (ФГДС), и неинвазивные, не требующие проведения ФГДС. 

Из неинвазивных методов диагностики инфекции H. pylori в последнее время интенсивно применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). По данным многих исследователей, он является высокоспецифичным (это обеспечивается подбором праймеров, комплементарных уникальной нуклеотидной последовательности исследуемого микроорганизма), высокочувствительным (позволяет диагностировать не только острую, но и латентную форму инфекции, дает возможность выявлять малое количество бактерий). 

С помощью ПЦР можно быстро получить результаты, используя доступные биологические образцы (кал), особенно в случае наличия малого количества, и/или плохо культивируемых, и/или медленно растущих H. pylori. Методика ПЦР позволяет проводить мониторинг течения инфекции и оценивать эффективность лечения. Метод также может быть полезен для изучения распространенности инфекции H. pylori в бессимптомной популяции. 

Инфекцию H. pylori успешно лечат (эрадикация H. pylori), но это не исключает вероятности повторного инфицирования. Вопрос о необходимости эрадикации H. pylori решают индивидуально. Тактика врача во многом зависит от клинических проявлений инфекции, результатов лабораторных исследований (№ 1303HEL 13С-УДТ, № 484 Антиген в кале) и, что особенно важно, наличия патологических изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки (№ 524 Гастрит, ассоциированный с Helicobacter pylori). 

Аналитические показатели: чувствительность определения ДНК H. pylori – 100 копий в образце, специфичность – 100%.

1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. - М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

Специальной подготовки не требуется. Взятие биоматериала (кал) на исследование проводят не ранее 2-4 недель после завершения эрадикационной терапии.

1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. - М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

• клинический диагноз – гастрит или язвенная болезнь; 
• невозможность выполнения инвазивной диагностики в связи с возрастом (дети) или состоянием пациента.

1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. - М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

Форма представления результата 

Результат выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено». 

Интерпретация результатов 

«Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для H. pylori; инфицирование H. pylori. 

«Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не обнаружен фрагмент ДНК, специфичный для H. pylori, или концентрация ДНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. - М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262